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BBa_R0051과 pSB1K3 플라스미드를 제한효소(EcoRI, SpeI)로 절단해 insert와 backbone을 분리
전기영동과 DNA 정제를 통해 원하는 insert 밴드를 선별하고, backbone과 교차 라이게이션을 수행
재조합된 플라스미드를 E.coli에 형질전환하고 항생제 선택 배지에서 생존 여부를 확인
항생제 내성 변화와 색상 발현을 기준으로 프로모터 발현과 유전자 클로닝 성공 여부를 스크리닝
라이게이션 효율(몰비, 반응 조건)에 따른 실패 사례를 분석하며 유전자 발현 결과의 원인을 추적